i-MAX™Ⅱ DNA Polymerase
Proofreading 기능을 가지고 있어 작은 size DNA부터 20 Kb 이상의 DNA까지 증폭이 가능한 높은 감도, 정확성 및 낮은 에러율을 가진
PCR core Kit
i-MAX™ II DNA Polymerase는 Taq DNA Polymerase와 Pfu DNA Polymerase의 장점을 취하여 각 효소의 단점을 극복하고 새로운 기능을 얻은 효소로서, Proofreading 기능을 가지고 있어 작은 size DNA(4~5 Kb 이하)부터 20 Kb 이상의 DNA까지 증폭이 가능한 제품입니다.
Taq DNA Polymerase는 template가
5 Kb를 넘는 경우 증폭효율이 현저히 떨어지며 주형의 종류에 따라 다르기는 하지만 10 Kb나 그 이상의 DNA 주형은 증폭하기 어렵습니다.
이런 현상은 Taq DNA Polymerase에 proof-reading 활성이 없기 때문으로, DNA 합성과정에서 mismatched nucleotide가 삽입되는 경우 template에서 떨어져서 중합에 실패하기 때문입니다.
Taq DNA Polymerase의 이러한 결함은 교정기능이 있는 내열성 DNA polymerase를 함께 사용하며 극복될 수 있습니다. 이러한 교정 기능은 DNA Polymerase가
중합반응을 진행하는 중에 mismatched(상보적이지 않은) nucleotide가 끼어든 경우 이를 제거하고 상보적인 nucleotide로 교정할 수 있다는 것입니다. 이러한 활성은 Taq DNA Polymerase보다 더 정확한 염기서열의 PCR 산물을 얻을 수 있도록 하기도 하지만, Taq DNA Polymerase에 비하여 더 긴 DNA template를 증폭할 수
있도록 해줍니다.
이러한 교정기능이 있는 내열성 DNA Polymerase 중 대표적인 효소가 Pfu DNA Polymerase로 일반적인 Taq으로는 증폭이 어려운 긴 size의 PCR(up to ~ 30 kb)에 적합한 효소로 일반 Taq DNA Polymerase에 비해 높은 fidelity와 proof reading 기능을 가지고 있습니다. 하지만 Pfu DNA Polymerase는 중합효율이 떨어져 DNA 중합에 더 많은 시간을 필요로 한다는 단점을 가지고 있습니다.
i-MAX™ II DNA Polymerase는 이와 같은 Taq DNA Polymerase와 Pfu DNA Polymerase의 장점을 취하여 하여 비해 작은 size (4~5Kb 이하) 뿐만 아니라 긴
size에서의 증폭률을 증가시켰음은 물론, 민감도 부분에서도 우수한 결과를 나타내는 제품입니다.
| Content | 250 Units |
|---|---|
| i-MAX™ II DNA Polymerase(5U/ul) | 250 units x 1 tube |
| 10× PCR Buffer(w/20 mM Mg2+) | 1.5 ml x 1 tube |
| 10× Mg2+ free PCR Buffer | 1.5 ml x 1 tube |
| 10 mM dNTPs (2.5 mM/each) | 800 ul x 1 tube |
| 25 mM Mg2+ | 1.5 ml x 1 tube |
| Manual | 1 ea |
참고. 10x i-MAX™ II PCR Buffer
Sensitivity 타사 비교
DNA 증폭에 있어서 민감도(sensitivity)를 측정하기 위해 타사 동일기능의 제품과 i-MAX™ II DNA Polymerase를 비교하였습니다.
결과에서
볼 수 있듯이, i-MAX™ II DNA Polymerase는 타사제품에 비해 약 100배~1,000배 정도 적은 양의 DNA도 효과적으로 증폭하고 있음을 보여주고 있습니다.
Lane M, 100 bp Ladder DNA Marker; lane 1, 25 ng gDNA; lane 2, 5 ng gDNA; lane 3, 1 ng gDNA; lane 4, 200 pg gDNA; lane 5, 40 pg gDNA; lane 6, 8 pg gDNA; lane 7, 1.6 pg gDNA; lane NC, negative control
Batch별 안정성 test 결과 관찰
i-MAX™ II DNA Polymerase의 제조 batch에 따른 Lamda DNA를 template로 하여 1 Kb size에 대한 민감도 활성을 통해 batch variation을 확인하였습니다. 각 증폭 유형별 batch 들의 동등한 활성을 확인 할 수 있습니다.
Lane M, 1 Kb DNA ladder; lane NC, Negative control; lane 1, 100 ng lamda DNA; lane 2, 50 ng lamda DNA; lane 3, 25 ng lamda DNA; lane 4, 12.5 ng lamda DNA; lane 5, 6.25 ng lamda DNA; lane 6, 3.125 ng lamda DNA; lane 7, 1.5625 ng lamda DNA
8입니다. i-pfu™의 경우 1X10-6입니다.
| 상품명 | Cat.No | 용량 | 가격 | ||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 2X PCR Master mix Solution (i-MAXⅡ) |
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| Maxime™ PCR PreMix (i-MAXⅡ) |
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| dNTP Mixture (2.5mM) |
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