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RT/RT-PCR

Maxime™ RT PreMix (Oligo (dT)15 Primer) 

Cat.No 용량 주문수량 판매가
25081 96 tubes up down 135,000원
PRODUCT INFORMATION
Description

진핵세포 RNA로부터 간편하고 빠르게 cDNA를 합성할 수 있는 Dried & aliquoted RT PreMix Kit

  • • OptiScript™ RT System 적용으로 cDNA 합성률 우수
  • • Oligo dT15 primer 가 포함되어 다양한 유래의 RNA로부터 cDNA 합성이 가능한 제품
  • • RNA의 2차 구조를 풀기 위한 별도의 열 전처리 과정이 불필요하며, 신속한 역전사 가능
  • • Dried & aliquoted PreMix, All-in-one 제품
       - 반응에 필요한 모든 시약이 tube 하나에 dried pellet 상태로 되어 있음
       - Template 및 RNase free DW 첨가만으로 cDNA 합성 가능
  • • 제품 안정성 및 재현성이 매우 우수함
       - ALHP system에 의한 dried & aliquoted PreMix로 재현성 우수
       - 진공압축제조공법에 의해 산화 및 수분방지로 안정성 우수

Maxime™ RT PreMix Kit(Oligo dT15 Primer)는 진핵세포의 RNA로부터 cDNA 합성을 간편하고 빠르게 할 수 있는 제품입니다. 본 제품은 기존의 2 step(RNA denaturation, cDNA 합성)이었던 cDNA 합성과정을 PCR machine을 이용하여 PCR tube 내에서 1 step으로 진행이 가능한 제품입니다.

Maxime™ RT PreMix Kit(Oligo dT15 Primer)는 OptiScript™ RT System을 포함하여 RT 반응에 필요한 모든 구성요소(Oligo dT15 Primer, dNTP mixture, reaction buffer 등)가 ALHP system에 의해 각각의 PCR tube에 포함되어 dried pellet 상태로 되어 있기 때문에 실험자 간의 pipetting에 오는 실험 오차를 현저히 줄일 수 있어 재현성이 매우 우수하며 진공압축제조공법에 의해 제품 내의 주요 구성 성분의 산화 및 수분방지로 인하여 활성 안정성이 매우 뛰어난 제품이라 할 수 있습니다. 또한, 본 제품은 template RNA 및 RNase free DW 첨가만으로 간편하게 cDNA 합성이 가능합니다. 본 제품은 Oligo dT15 Primer가 포함되어 있어 poly(A) tail을 갖는 진핵세포 RNA에 적용이 용이하며 유사 제품인 Maxime™ RT PreMix(Random Primer)과 더불어 고객분들의 사용 목적에 따라 선택이 가능합니다.

Applications
  • 01First strand cDNA synthesis
  • 02Construction of full length cDNA libraries
  • 03Real-time RT-PCR
  • 04RT-PCR
  • 05DNA labeling
  • 06Primer extension
Kit Contents
Contents 25081
Maxime™ RT PreMix Kit(Oligo dT15 Primer) 96 tubes
Manual 1 ea

[ 참고. Maxime™ RT PreMix Kit(Oligo dT15 Primer) ]

Component in 20 ml reaction

  • • OptiScript™ RT System
  • • Reaction Buffer
  • • RNase Inhibitor
  • • Primer – Oligo dT15 Primer
  • • Stabilizer
  • • dNTP Mixture
Technical Data

Manual type의 cDNA 합성 성능 비교 관찰

 

Human 유래의 RNA를 1 ug 부터 1/3씩 순차 희석하여 자사 manual type cDNA 합성 Kit인 Power cDNA Synthesis Kit와 Maxime™ RT PreMix Kit series를 이용하여 cDNA 합성한 후 당사의 Maxime PCR PreMix Kit(i-StarTaq)으로 PCR 진행하여 합성 효율을 관찰하였습니다. 그 결과, Maxime™ RT PreMix Kit는 기존의 manual type 제품인 Power cDNA Synthesis Kit 와 동등 수준의 성능을 관찰하였으며, random primer 제품과 oligo dT15 primer 제품 간의 성능 또한 동등한 수준의 민감도를 확인할 수 있습니다.

Panel A, p53 gene (218bp) amplification; Panel B, Interleukin -10 gene(IL-10, 1.1kb) amplification
A, Power cDNA Synthesis Kit; B, Maxime RT PreMix Kit(oligo (dT)15 Primer); C, Maxime RT PreMix Kit(Random Primer)
Lane M, DNA Marker; lane N, no template control

품질 안정성 관찰


 

Human cell(SNU-1)로부터 추출한 RNA를 1 ug 부터 1/3 간격으로 serial dilution 한 RNA를 Maxime™ RT PreMix(Oligo (dT)15 Primer)를 이용하여 cDNA 합성한 후 이를 당사의 Maxime PCR PreMix Kit(i-StarTaq)을 사용하여 GAPDH gene (575bp)를 증폭하여 보관 기간에 따른 안정성을 확인한 결과, 1년까지 안정됨을 확인하였습니다. Maxime™ RT PreMix(Oligo (dT)15 Primer)는 진공압축제조공법에 의해 냉동 보관 조건 하에서도 산화 및 수분의 혼입을 차단하여 제품의 성능을 처음 상태 그대로 1년간 유지하는 제품입니다.

TroubleShooting Guide
Q제품을 보면 oligo dT 15mer size가 포함되어 있는데, oligo dT 20mer size로 된 제품이 있나요?
A당 사의 제품은 일반적으로 고객분들이 oligo dT 15mer 를 많이 찾으셔서 15mer를 기준으로 제작되어 있는 제품입니다.
QRT premix로 합성한 cDNA 저장 기간은 얼마나 되나요?
A합성된 cDNA는 사용할 양만큼 aliqout하여 -70℃ 보관을 권장 드리며, 보관 기간은 -70℃에서 6개월 정도 생각하시면 됩니다.
Q다른 회사의 RT 제품은 RNA의 Denaturation step 이 있던데 인트론은 preheating step이 불필요하다고 되어 있습니다.
진행하지 않아도 되나요?
A당사는 차별화를 위해 RNA의 2차 구조를 풀어주기 위한 pre-heating을 진행하지 않고 2 단계 (45℃, 1hr/ 95℃, 5min)만으로 cDNA를
합성할 수 있도록 하였습니다. 일부 고객 분들은 pre-heating step 진행 후 개선된 cDNA 합성 효율을 얻으셨다고 합니다.
따라서 별도 처리하셔도 무방합니다.
QOligo dT primer 와 Random primer의 차이가 무엇인가요?
AOligo dT primer 는 mRNA의 A-tail에 binding하여 cDNA 합성을 진행하며, Random primer는 mRNA 뿐 아니라 rRNA, tRNA total RNA에 Random하게 binding하여 cDNA를 합성합니다. 때문에 mRNA를 target으로 할 경우 Oligo dT primer를 많이 사용하시며,
A tailing이 약한 경우에는 Random primer를 사용하시면됩니다.
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