RNA
easy-BLUE™ Total RNA Extraction Kit
PRODUCT INFORMATION
* 본 제품은 유해화학물질(페놀 및 이를 5%이상 함유한 혼합물)을 포함한 제품입니다. 유해화학물질 시약정보요약서(MSDS 페이지에서 확인 가능)를 제공하고 있으니 구매 시 확인해 주시기 바랍니다
Description
Cell, Tissue, Plant 등의 시료로부터 쉽고 간단하게 고수율 및 고순도의 total RNA를 추출할 수 있는 Solution type의
제품
- • Cell, Tissue, Plant 등의 고형시료로부터 total RNA 추출
- • Deep-Cyan Blue color Solution으로 aqueous phase/phenol phase 구분 용이
- • 고순도의 water-saturated phenol을 사용하여 고효율 및 고순도의 total RNA 추출 가능
- • 시료별로 최적화된 Protocol 제공
- • Cross-contaminant를 완벽히 제거하여 정확한 downstream applications 이 가능
easy-BLUE™ Total RNA Extraction Kit는 Cell, Tissue, Plant 등의 고형시료로부터 쉽고 빠르게 total RNA를 추출할 수 있는 Solution type의 제품입니다.
Cell, Tissue에서 효과적으로 RNA를 추출하기 위해서는 Cell 혹은 tissue를 효과적으로 용해 할 수 있어야 하며, 핵산 단백질 등을 효과적으로 변성시키고,
세포 유래의 RNase의 활성을 억제해야 합니다.
그러한 관점에서 easy-BLUE™ Total RNA Extraction Kit는 tissue나 cell로부터 RNA를 가장 효과적으로 추출할 수 있는 제품이며 RNA 추출 시료량이 적절할 경우
이론적으로 단백질 및 genomic DNA의 오염이 거의 없는 순수한 RNA의 추출이 가능한 제품입니다.
또한 easy-BLUE™ Solution은 고순도의 water-saturated phenol을 사용하여 고수율 및 고순도의 total RNA 획득이 가능하며 시료별로 최적화된 protocol을
제공(표 1. 참고)하고 있어 누구나 쉽고 편리하게, 재현성 높은 결과를 얻을 수 있도록 하였습니다.
본 제품으로부터 획득한 total RNA는 cDNA 합성, RT-PCR, Real-time RT-PCR, Northern blotting 등에 바로 사용 가능합니다.
표 1. Protocols of easy-BLUE™ Total RNA Extraction Kit
Applications
- 01RT-PCR and Real-time RT-PCR
- 02Northern Blotting
- 03cDNA Synthesis
- 04Primer extension
- 05Infectious disease research
Kit Contents
| Contents |
Package |
| easy-BLUE™ Solution |
100ml × 1 ea |
| Manual |
1 ea |
Technical Data
다양한 조직 및 세포로부터의 Total RNA 추출
easy-BLUE™ Total RNA Extraction Kit를 이용하여 다양한 세포와 조직에서 RNA를 추출한 결과,
순도 높은 RNA를 추출할 수 있음을 확인하였습니다.
Lane M, 1 Kb Marker; lane 1, SNU 601(Human); lane 2, K562(Human); lane 3, B16(Mouse); lane 4, E. coli; lane 5, Spleen(Mouse); lane 6, Kidney(Mouse); lane 7, Liver (Mouse)
타사 제품과 품질 비교 관찰
easy-BLUE™ Total RNA Extraction Kit를 이용하여 다양한 세포와 조직에서 RNA를 추출한 결과,
타사 제품 대비 동등 이상의 추출 효율을 볼 수 있습니다.
TroubleShooting Guide
- Qeasy-BLUE를 이용하여 plant에서 RNA를 추출하고자 합니다.
protocol 상 P-buffer가 필요하다고 되어 있는데 P-buffer의 조성은 어떻게 됩니까?
- A[P-Buffer (for Plant) : Final 0.8M sodium citrate 1.2M NaCl]
상기의 내용은 제품 매뉴얼의 'PREPARING SOLUTION BEFORE USE' 부분에서도 확인하실 수 있습니다.
또한 Plant RNA 추출 시 Column이 추가된 “easy-spin™ llp Plant RNA Extraction Kit” 전용제품도 있습니다.
- QKidney에서 RNA를 추출하고자 합니다. easy-BLUE 제품을 사용하려고 하는데 kidney 조직이 단단하여 homogenization 시
RNA가 degradation이 많이 될 것 같습니다. RNA 회수율을 높일 수 있는 방법이 있습니까?
- A먼저, 조직을 얇게 절편한 뒤 Liquid N2를 약간 첨가하여 조직을 homogenization 시켜 사용하시는 경우 수율과 순도를 높일 수 있습니다.
또한 냉/해동이 반복되지 않도록 유의하여 실험하시고 kidney 등의 조직은 전사가 활발한 조직으로 10mg 정도만 사용하시기를 바랍니다.
- Qeasy-BLUE™를 사용하고 있는데 매번 gDNA 오염이 잘 되는 것 같습니다. gDNA 오염을 줄일 수 있는 방법은 어떤 것이 있습니까?
- Aaqueous 층을 옮기는 스텝에서 pipetting을 강하게 하지 마시고 프로토콜에 기재된 양(400ul)만 덜어주시기 바랍니다.
좀 더 많은 RNA를 추출하기 위해 많은 양을 취하려 하다 보면 interface 층의 gDNA가 함께 혼입될 경우가 있습니다.
- Q지인을 통해 easy-BLUE를 봤는데 푸른빛이 RNA 순도와 회수율에 영향을 주지는 않나요?
- Aeasy-BLUE가 푸른빛을 띠는 이유는 pH indicator를 첨가함으로써 RNA의 회수율을 높이기 위함입니다.
특히 푸른색을 띠고 있어 aqueous 층 분리 시 구분 용이하여 실험하기에 더욱 편리합니다.
- Qeasy-BLUE를 계속 사용하고 있었는데, 제품을 몇 번 사용하지 않았는데 색상이 푸른색에서 검은색으로 변색 되었습니다.
그냥 사용해도 RNA 회수율에는 이상이 없는 건가요?
- Aeasy-BLUE의 푸른빛은 pH indicator가 들어있기 때문입니다. 즉 색상이 변화였다는 것은 pH가 변했다는 것을 의미하므로 RNA 회수율이 낮아질 수 있어 새로운 제품을 사용하실 것을 권장해드립니다.
또한 색상이 변하는 이유는 공기에 의해 산화나 제품을 4℃ 보관이 아닌 상온 보관 시 변색이 일어나는 경우가 많기 때문에
제품이 변색되지 않도록 보관, 사용하신다면 높은 RNA 회수율을 얻으실 수 있습니다.
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