“ 정확한 단백질 농도 측정, 연구 성공의 첫걸음＂

 

-iNtRON의 SMART™​ BCA Protein Assay  솔루션 

 

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SMART™​ BCA Protein Assay 고객 문의 및 답변

-실험 현장에서 가장 많이 나오는 질문, 인트론바이오가 답합니다.

 

 

Q1. SMART™​ BCA Protein Assay를  사용 중인데 ,낮은 단백질 농도도 측정 가능한가요?

A1. SMART™​ BCA Protein Assay는 20µg/ml 이상 농도에서 정확한 측정이 가능합니다. 매우 낮은 농도의 단백질은 감도가 떨어질 수 있으므로, 필요 시 시약 희석 비율이나 반응 조건을 최적화 해야 합니다.

 

 

Q2. SMART™​ BCA Protein Assay 의 정량 범위가 20~2,000 µg/ml이라고 하는데, 50ng/ml 정도의 더 낮은 농도를 측정하고 싶습니다. 방법이 있을까요?

A2. 초저농도의 단백질 측정 전용 시약인 PRO-MEASURE™​ Protein Measurement Solution 을 추천 드립니다. 

이 제품은 Bradford assay 기반으로 10~200 ng/ml 수준의 단백질을 빠르고 간편하게 정량할 수 있습니다. 

또한 SMART™​ BCA Protein Assay 제품과 동일한 가격대로 제공되어, 연구 환경에 맞춰 필요 시 두 제품을 병행 사용하실 수 있습니다.

 

 

Q3. SMART™​ BCA Protein Assay 제품 사용 중인데, Spectrophotometer 측정 할 때, 샘플 시료를 2ml 이 아닌 1ml 만 사용해서 측정해도 될까요?

A3. 해당 제품은 권장 프로토콜에 조건에 맞춰 정확성과 재현성을 최적화한 제품입니다. 물리적으로 사용은 가능하지만, 측정 길이와 반응 용량의 차이로 인해 결과에 미세한 오차가 발생 할 수 있습니다. 매뉴얼 가이드에 따라 실험하시는 것을 권장 드립니다.

 

 

Q4. Standard Curve는 어떻게 만들면 좋을까요?

A4. BSA (Bovine Serum Albumin)을 0, 25, 125, 250, 500, 750, 1000 µg/ml 농도로 희석하여 사용합니다. 반드시 실험 시 마다 Standard Curve를 새로 만들어 샘플과 동일한 조건에서 측정해야 정확합니다.

 

 

Q5. 시료에 어떤 물질이 있으면 BCA Assay에 방해가 되나요?

A5. 환원제(예:DTT, ß-Mercaptoethanol), EDTA, 일부 계면활성제, 고농도의 염 등이 측정에 영향을 줄 수 있습니다. 시료 전처리나 희석을 통해 간섭 물질을 최소화 해야 합니다.

 

 

단백질 정량 (Protein Quantification)이란?

 

▶ 단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양이나 농도를 정확하게 측정하는 과정을 말합니다. 이는 생화학, 분자 생물학, 임상 진단 등 다양한 분야에서 매우 중요한 단계로, 실험 결과의 신뢰성과 재현성을 확보하기 위해 필수적입니다.

 

▶단백질 정량의 주요 목적

•단백질 농도 파악으로 실험 조건 표준화.

•효소 활성 측정, 단백질 발현 분석, 구조 연구 등에 필요한 기초 데이터 제공.

•시료 비교 및 분석을 위한 정량적 기준 마련.

 

▶ 단백질 정량 방법 예시

• BCA assay : 단백질과 구리 이온이 반응해 발생하는 색 변화를 측정.

• Bradford assay : Coomassie Brilliant Blue 염료가 단백질과 결합하여 색이 변하는 정도를 측정. 

 

단백질 정량법 비교 : SMART™​ BCA vs. PRO-MEASURE™​

 

 

 [Technical Data] SMART™​ BCA Protein Assay

 Sensitivity 비교 실험 (타사 비교) 

 

 SMART™​ BCA Protein Assay Kit(for Standard Assay)은 경쟁사 제품보다 15~20% 이상의 높은 민감도를 보입니다. 비색 반응은 micro well plate reader로 측정됩니다. (37℃, 30분 반응)

 

 

 High Fidelity​

 

SMART™​ BCA Protein Assay Kit(for Standard Assay)은 경쟁사 제품 보다 더 높은 민감도 (기울기)를 보였으며, 단백질 간 variations는 유사한 패턴을 나타냈습니다.

Panel A. SMART™​ BCA Protein Assay Kit. Panel B. Competitor 

 

 

​[실험 가이드] SMART™​ BCA Protein Assay

 

- Working Solution 제조

• Solution A : Solution B = 50 : 1 (예: 50ml + 1ml)

• 제조 직후 녹색 투명 용액으로 변함.

• 실온 밀폐 보관 시 수일간 안정.

 

 

- 실험 방법

1. Microplate 방법 (Sample : WS = 1:8)

 1. 표준액 또는 시료 25ul(혹은 10ul, 단 측정범위 125~2,000 µg/ml로 제한) 취함.

 2. Working Solution 200ul 첨가 후 혼합.

 3. 37℃에서 30분 반응.

 4. 실온에서 식힌 뒤 562nm(540~590nm 가능)에서 흡광도 측정.

 5. Blank 보정 후 Standard Curve 작성· 농도 계산.

 

 

2. Test Tube 방법 (Sample : WS = 1:20)

 1. 표준액 또는 시료 0.1ml 취함.

 2. Working Solution 2ml 첨가 후 혼합.

 3. 37℃에서 30분 반응 → 실온 식힘.

 4. 562nm에서 측정.(10분 내 완료)

 5. Blank 보정 후 Standard Curve 작성· 농도 계산.

 

 [실험 가이드] PRO-MEASURE™​ Protein Measurement Solution

 

- 사용 전 준비사항 (PREPARATION)

• 사용 전 1:9 비율로 멸균수로 희석 (예: 5ml 원액 + 45ml 멸균수)

 

 

- 실험 방법

 1. 시료 100ul 준비.

 2. 희석한 PRO-MEASURE™​ 용액  1ml 첨가.

 3. 실온에서 2분 반응.

 4. 595nm에서 측정.

 5. Blank 보정 후 Standard Curve 작성·농도 계산.

 

 

“ 연구의 시작과 끝, 정확한 단백질 측정과 함께 하세요“

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